Durch die Bewahrung Xandars vor der Zerstörung sind die Guardians rund um Star-Lord Peter Quill (C. Pratt) zu den angesagtesten Helden des Universums geworden und so bekommen sie schon kurz darauf ihren nächsten Auftrag. Für Ayesha (E. Debicki), Anführerin der Sovereign, sollen sie sich, im Tausch gegen Gamoras (Z. Saldana) Schwester Nebula (K. Gillan) auf einen Kampf mit dem Weltraummonster Abilisk einlassen. Die Mission gelingt, doch nachdem Rocket einen Teil der Beute stiehlt, eröffnen die Sovereign die Jagd auf die Guardians. Als dabei die Milano auf einem fremden Planeten notlanden muss, scheint das Ende der Helden bereits besiegelt. Nur das Eingreifen eines fremden Wesens namens Ego (K. Russell) rettet die Guardians in letzter Sekunde. Ego erweist sich als gottgleiches Wesen und der Planet auf dem die Milano gelandet ist ein Teil seines Körpers. Doch die vielleicht größte Wahrheit: Er ist Peters lang gesuchter Vater. Gemeinsam mit Gamora, Drax (D. Bautista) und Egos Zieh-Tochter Mantis (P. Klementieff) macht sich Peter auf dem Weg mehr über die Welt seines Vaters und sein eigenes Schicksal zu erfahren. Allerdings hegt Ego weitaus finsterere Pläne und auch die Sovereign sind mit den Guardians noch nicht fertig und hetzen ihnen Yondu Udonta (M. Rooker) auf den Hals...